【NCG技术】N-氨甲酰谷氨酸对断奶环江香猪肠道微生物区系的影响
-
- -
摘 要
试验选用体重为 3.17 ± 0.21 kg 的 21日龄断奶环江香猪 12 头，随机分为2组，每组6头，分别饲喂添加0.1% NCG日粮和基础日粮，试验期为 14d。试验结束时，采集回肠和盲肠内容物，利用 T-RFLP、PCR/ DGGE 和荧光定量 PCR 技术，测定其肠道微生物区系的变化。结果表明，与对照组相比，NCG组回肠内容物中微生物的多样性增加，回肠和盲肠内容物中双歧杆菌和乳酸杆菌的数量显著增加、大肠埃希菌的数量显著降低 (P＜0.05)，盲肠内容物中链球菌的数量也显著降低(P＜0.05)。可见，日粮中添加 0.1% NCG 有助于提高断奶环江香猪肠道内容物中有益菌的数量、抑制有害菌的繁殖，从而改善肠道微生物区系。
1 前 言
新生仔猪的肠道菌群发育快速并趋于稳定，但断奶极易破坏肠道微生态平衡，使病原菌大量繁殖，引起仔猪的腹泻、生长不良、消化功能紊乱和免疫力下降等。大量研究表明，外源补充精氨酸能调节机体氨基酸的吸收和代谢，并促进其肠道发育和功能，增强肠道健康，从而提高机体免疫力，上述作用可能与其对肠道微生物的调控有关。N-氨甲酰谷氨酸(NCG)作为尿素循环中鸟氨酸生成瓜氨酸的中间体N-乙酰谷氨酸的类似物，可有效激活内源性精氨酸的合成，外源添加NCG能够发挥和精氨酸类似的功能，并且极大地降低成本。本研究观察了日粮中添加NCG对断奶环江香猪肠道微生物区系的影响，为阐明NCG的促生长机制提供依据。
2 材料与方法
选用体重为3.17±0.21kg的21日龄断奶环江香猪12头，随机分为2组，每组6头，单栏饲养。按中国地方猪营养需要量并结合NRC(1998)营养需要量配制本试验基础日粮。试验组在基础日粮中添加0.1% 的NCG(含量50%)，对照组饲喂基础日粮。日粮中加入2倍水后，调成粥状饲喂。每日饲喂4次，自由采食和饮水。预饲3d后，逐头称取空腹体重。因断奶14d后,断奶应激基本消失，故本试验试验期为14d。试验结束时，采集回肠和盲肠内容物，利用分子生物学技术测定其肠道微生物区系的变化。
3 结果与分析
3.1 NCG对肠道微生物多样性的影响
由表 2 可见，回肠和盲肠内容物中微生物的TRF 数变化显著；与对照组相比，0.1% NCG 组回肠内容物微生物的 TRF 数增加，提示肠道微生物的多样性提高。
表2 日粮添加NCG对肠道微生物酶切末端限制性片段的影响（%：n=6）
bp
回肠
盲肠
0.1%NCG组
对照组
0.1%NCG组
对照组
45
1.20
1.17
-
-
61
17.02
-
1.10
1.63
64
37.81
-
33.12
36.5
67
-
-
-
1.50
70
-
1.32
-
1.46
208
-
-
1.34
-
248
17.25
1.03
24.81
5.53
250
-
-
-
1.89
259
1.11
-
-
-
265
12.69
45.85
33.20
17.95
268
-
-
-
2.28
278
-
-
1.11
2.50
308
5.50
1.46
1.83
10.55
316
-
-
1.04
-
321
-
-
1.13
2.52
331
7.42
49.18
1.33
15.68
由图1可见，NCG组回肠内容物中微生物 16S rRNA 的 DGGE 条带数 (14.7 ± 1.6) 较对照组 (12.2 ± 1.0) 有增加趋势，说明日粮添加NCG可增加试验猪回肠微生物菌群的多样性。由图2可见，对照组和 NCG 组盲肠内容物中微生物区系的相似性达 60% 以上。
注：1-6泳道代表NCG组，7-12泳道代表对照组，下同。
3.2 NCG对肠道部分细菌数量的影响
由表3可见，饲喂 0.1% NCG 14d后，回肠和盲肠内容物中双歧杆菌和乳酸杆菌的数量显著增加、大肠埃希菌的数量显著降低 (P ＜0.05)，盲肠内容物中链球菌的数量也显著降低 (P ＜0.05)。
表3 日粮添加NCG对肠道部分细菌16S rRNA 的影响（n=6）
肠段
项目
0.1%NCG组
对照组
回肠
双歧杆菌
1.42±0.15*
1.00±0.12
乳酸杆菌
1.64±0.17*
1.00±0.13
链球菌
0.82±0.10
1.00±0.15
大肠埃希菌
0.62±0.12*
1.00±0.16
盲肠
双歧杆菌
1.93±0.14*
1.00±0.18
乳酸杆菌
1.54±0.19*
1.00±0.16
链球菌
0.68±0.09*
1.00±0.13
大肠埃希菌
0.60±0.08*
1.00±0.09
4 结 论
日粮添加NCG可促进断奶环江香猪肠道发育和功能，增强肠道健康，增加肠道菌群的多样性，抑制大肠埃希菌、链球菌等有害菌的繁殖，促进乳酸杆菌、双歧杆菌等有益菌的繁殖，有效地缓解仔猪断奶应激。
参考文献略。
友情链接